第三章 全是脱靶点（1 / 3）

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正饶有兴致地观摩着大眼仔的白发老头，缓缓转身，对卢赫微微颔首，“你好，我叫海昼天，很高兴认识你。”

卢赫被按在冰箱上动弹不得，挣扎未果后，回答道：“我认识你不高兴，先回答我，你们把她怎么了？”

“哦，那个小丫头啊，她太闹腾了，只好让她先睡一会儿。”老头微微一笑，“放心，我们是来谈合作的，不会伤害你的员工。”

“你是谁啊，谁要跟你合作？不管你是怎么找来的，赶紧给我滚！否则我报警了啊！”

“哦？报警？你确定吗？你的这间实验室，有经营资质吗？”

“你是个法盲吧，我仪器都是正经厂家那里备过案的，自己用，不经营。退一万步说，宁为玉碎不为瓦全，就算有问题，我也得跟你同归于尽。都什么时代了，还玩儿私闯民宅这一套！我院子里可有监控，说不定物业这会儿就已经报警了，我劝你趁早走，我就当没见过你！”

“哈哈。”缩在角落里摆弄手机的精瘦麻秆冷不丁地笑了一声，激得卢赫起了一身鸡皮疙瘩。

“放心，物业肯定管不了你这事。你最好先冷静一下，然后我们好谈事。谈完了，我自然会走。”老头脸上的笑意更明显了。

卢赫打量着对面的两个人。老头虽然头发全白，但脸上的皱纹并不多，年纪应该不大。玩儿手机的麻秆顶着个爆炸头，一直把脸埋在阴影里，看不清容貌。至于正按着自己的壮汉，不管他相貌几何，卢赫都打不过他。

完全没有反击的机会，他索性做出妥协的样子，口气放软：“好，好。谈，我们谈。你先让他松开我，我颈椎不好一会儿该给我搞晕了。”

老头用眼神示意了壮汉，后者缓缓放开了卢赫。

卢赫活动了一下肩膀，走到菜菜身边探了一下鼻息，然后拉了一把椅子坐了下来，“谈吧。”

老头饶有兴致地点了几下鼠标调出了电脑桌面上的脱靶分析软件，看了几眼，悠悠地转身，“cRISpR-cAS9，简单易学又好用。但它有个缺点，它与靶点的特异性结合需要NGG。火焰龟的碱基序列，你应该很熟悉吧，NGG可不多啊。如果用cRISpR，很容易会脱靶的。所以，你是用了神话核酸酶tALEN还是锌指？”

“tALEN虽然很容易设计，但是组装起来的难度只增不减，细胞毒性又强，还不如锌指。本来给乌龟做导入就已经够难的了，再来点毒性，怕是成功的几率还不如中彩票大。”

“所以呢。”老头慢慢渡步到卢赫面前，俯视着他，“你用的是锌指，对吧？”

卢赫抬眼与老头对视，没有说话。

“在那个锌指技术专利还没有过期的年代，你们那个经费充足出手阔绰的实验室，买下了圣加蒙公司的锌指设计平台。依托这样的资源，你组装了一个完美无缺的锌指结构，敲掉了黑色素表达相关的位点，编辑出了一只通体金黄的火焰龟。”

“你的运气出奇的好，这是个编辑后的突变是双等位基因突变，所以一代编辑龟是个纯合子，它的子一代要么是高系数宽纹，要么是金边大翅膀。我推测的没错吧？南州湾大学里德实验室唯一一位没有顺利毕业的研究生，卢赫。”

“人生在世，要生活下来，总要想法子挣钱。在钱面前，学术什么的，当然就显得不那么重要。你的锌指技术，让你年纪轻轻就过上了这么富裕的生活。凭这一点，我是十分欣赏你的。”

“所以，这位曾经的学术新星，现在的人气龟商。你有没有兴趣，帮我个忙，用你的锌指技术，编辑一下这份基因。”老头说着，从麻秆手中接过一个平板电脑，摆在了卢赫的眼前。

这是一份180mb的基因组。卢赫甚至没有翻页，仅凭大小就猜出这是2000年时被测出全基因组的黑腹果蝇，抬眼道：“怎么了？这有什么特殊的吗？”

“好！果然是当年的高材生。”老头嘴角上扬，“凭这点基本信息，就能知道是哪种生物，基本功很扎实呀。不过呢，关键点不在这里，你继续往下看。”

卢赫不以为然地翻了页，在读完第二页之后，他越翻越快，本是了无兴致的脸上逐渐写满了疑惑与震惊。

这是一份黑腹果蝇的基因组演化报告。果蝇不断被随机用cRISpR-cAS9技术敲除或敲入基因。脱靶分析显示，随着代数的增加，脱靶位点越来越带多，子代的成活率也越来越低。在322代时，子代无一活。

而测序结果更加出乎意料。从300代开始，碱基序列上的NGG就越来越少，无论怎样设计向导RNA，都无法完成与靶点的特异性结合。

而在之后的20代里，即便停止了编辑，NGG也仍然在逐渐减少，直至在322代中，关键位点全部都无法表达造成了细

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